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    HEK-293T人胚腎細胞

    HEK-293T人胚腎細胞

    簡要描述:HEK-293T人胚腎細胞介紹:
    種屬:人;懸浮生長;生長周期:3~4天
    HEK-293T細胞是293T(293tsA1609neo)細胞系(ATCC CRL-11268)的衍生物。細胞持續表達SV40抗原,該細胞常用于轉染實驗,轉染效率較高。(轉染一般以50%密度鋪板,待細胞剛剛貼到皿壁上后(一般8-10小時),即可進行轉染操作)。

    產品型號: YKLHEK-293T

    所屬分類:

    更新時間:2024-04-30

    詳細說明:

    HEK-293T人胚腎細胞介紹:

    種屬:人;懸浮生長;生長周期:3~4天

    HEK-293T細胞是293T(293tsA1609neo)細胞系(ATCC CRL-11268)的衍生物。細胞持續表達SV40抗原,該細胞常用于轉染實驗,轉染效率較高。(轉染一般以50%密度鋪板,待細胞剛剛貼到皿壁上后(一般8-10小時),即可進行轉染操作)。

    細胞形態:上皮細胞樣

    生長特性:貼壁生長

    培 養 基:MEM培養基,90%;FBS,10%

    生長條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%;溫度:37 ℃

    傳代方法:1:2至1:6,每周2次

    凍存條件:90%培養基+10% DMSO,液氮儲存

    支原體檢測: 陰性

    HEK-293T人胚腎細胞步驟:

    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm 皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

    1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

    2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

    3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

    4. 將細胞懸液按1:2比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

    3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為類:

    1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗一遍后加入1ml YM,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

    2. 4min 1000rpm離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。

    3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

     

     

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